1、化学分析法——甲醛滴定法甲醛滴定法用于氨基氮的测定,可以测出样品中总氨基酸的含量,其原理是在中性或弱碱性水溶液中,氨基酸的α—氨基与醛类反应生Schiff碱:α—氨基酸与甲醛反应生成亚甲基亚氨基衍生物2、分光光度法——茚三酮法茚三酮是一种能使氨基酸生成在可见光区有吸收的衍生试剂。该方法的基本原理是经阳离子交换柱分离出的氨基酸与茚三酮混合,经加热反应后,一级胺与之生成蓝紫色化合物,二级胺与之生成黄色化合物。两种衍生物使用双通道紫外检测器同步检测,检测波长分别为570nm和436nm。
什么叫甲醛滴定法?氨基酸是两性电解质,是弱酸,完全解离时pH为11―12或更高,若用碱滴定一NH3,所释放的H 来测量氨基酸,一般指示剂变色域小于10,很难准确指示终点。
常温下,甲醛能迅速与氨基酸的氨基结合,生成羟甲基化合物,使上述平衡右移,促使一NH3,释放H ,使溶液的酸度增加,滴定终点移至酚酞的变色域内(pH9.0左右)。因此,可用酚酞作指示剂,用标准氢氧化钠溶液滴定。
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